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[发明专利]一种NK细胞体外大规模诱导扩增培养方法-CN202010020487.5在审
发明人：陈勇 -专利权人：上海奕杉生物科技有限公司
申请日： 2020-01-09 - 公布日： 2020-05-08 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明公开了一种NK细胞体外大规模诱导扩增培养方法，包括以下步骤：采集外周血并分离外周血单个核细胞；将细胞接种至包被CD16和CD137L激活抗体的培养瓶中；加入无血清淋巴细胞培养基于细胞培养瓶内，使细胞密度为2‑4*106个/ml，此时种板为day0，将诱导因子加入到无血清淋巴细胞培养基中；培养4d后加入补充无血清淋巴细胞培养基，将激活因子加入到无血清淋巴细胞培养基中；培养9d后加入补充无血清淋巴细胞培养基，将扩增因子加入到无血清淋巴细胞培养基中。本发明可以达到完全无血清培养，操作方案操作较为简单，成本较低，得到的NK细胞在细胞活性，纯度，细胞数量以及杀伤活性方面具有显著优势。
一种 nk 细胞体外大规模诱导扩增培养方法

[发明专利]一种利用外泌体制备嵌合抗原受体T淋巴细胞的方法-CN201910672934.2有效
发明人：鲍会静 -专利权人：天津市中西医结合医院（天津市南开医院）
申请日： 2019-07-24 - 公布日： 2021-06-29 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明提供了一种利用外泌体制备嵌合抗原受体T淋巴细胞的方法，其包括：(1)获得对象的T淋巴细胞；(2)将所述T淋巴细胞培养后，提取外泌体；其后所述T淋巴细胞继续培养，得到T淋巴细胞培养物A；(3)用表达抗原嵌合受体的质粒转染所述外泌体，得到含CAR质粒的外泌体；(4)将(3)中的所述含CAR质粒的外泌体与(2)中的所述T淋巴细胞培养物A混合并培养，培养后得到所述抗原嵌合受体T淋巴细胞。本发明还提供了一种外泌体，根据前述方法制备的抗原嵌合受体T淋巴细胞，以及前述抗原嵌合受体T淋巴细胞在制备用于治疗癌症的药物中的用途。
一种利用体制嵌合抗原受体淋巴细胞方法

[实用新型]一种淋巴细胞培养装置-CN202222545513.3有效
发明人：程亚婷;李颖;汤浩;杨国华;陈志毅;丁国庆;黎妮 -专利权人：武汉百翼生物科技有限公司
申请日： 2022-09-26 - 公布日： 2023-06-13 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种淋巴细胞培养装置，包括淋巴细胞培养箱体、真空密封箱门、支撑圆盘、丝杆和培养皿，所述淋巴细胞培养箱体的内部上表面安装有杀菌灯和照明灯，所述丝杆的下方位置安装有第一锥形齿轮，所述淋巴细胞培养箱体的左侧安装有第一动力电机，所述淋巴细胞培养箱体的下方安装有第二动力电机，所述支撑圆盘和活动盘之间通过皮带相连接。该淋巴细胞培养装置设置有支撑圆盘、活动盘和皮带，启动第二动力电机，第二动力电机通过输出轴带动活动盘，而后活动盘在皮带的作用下带动支撑圆盘旋转，而后支撑圆盘在固定杆和导向杆的作用下带动培养皿旋转，从而便于对培养皿角度进行调节，从而可对培养皿不同位置的淋巴细胞进行观察。
一种淋巴细胞培养装置

[发明专利]一种用于自体淋巴细胞培养的组合物、培养液及其应用-CN202010940077.2有效
发明人：卢戌;刘静维;王跃;刘雪松;李君阳 -专利权人：北京奥康华医学检验所有限公司
申请日： 2020-09-09 - 公布日： 2022-07-26 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于自体淋巴细胞培养的组合物、培养液及其应用。本发明所要保护的用于自体淋巴细胞培养的组合物的活性成分由血浆、抗人CD3单克隆抗体、IL‑2、IL‑7、IL‑15和PHA‑P组成。相比较于作为对照的用于培养淋巴细胞的组合物，使用含有本发明所提供的组合物的培养基诱导培养外周血单个核细胞得到的T淋巴细胞亚群的含量显著升高；淋巴细胞数量在培养14天时也显著升高，升高了1.15倍；淋巴细胞对K562细胞的杀伤活性也显著增强，增强了1.6倍。本发明所提供的用于自体淋巴细胞培养的组合物可以用于特异性诱导扩增单个核细胞产生具有高纯度和较强生物学活性的自体淋巴细胞。
一种用于淋巴细胞培养组合培养液及其应用

[发明专利]一种淋巴细胞分离、经干细胞免疫调控及净化回输系统-CN202111185622.2在审
发明人：田沂;蒋永芳;李异;周宁;彭锋 -专利权人：中南大学湘雅二医院
申请日： 2021-10-12 - 公布日： 2022-01-04 - 主分类号： A61M1/16 文献下载
摘要：本发明公开了一种淋巴细胞分离、经干细胞免疫调控及净化回输系统，包括：血液分离模块，免疫调控模块，透析滤过模块和回输模块；其中，免疫调控模块用于采用干细胞培养液培养且免疫调控血液分离模块分离出的淋巴细胞，透析滤过模块用于对免疫调控模块排出的淋巴细胞混合液进行透析滤过。上述淋巴细胞分离、经干细胞免疫调控及净化回输系统，利用培养干细胞的干细胞培养液体外培养并免疫调控淋巴细胞，利用透析滤过模块对淋巴细胞进行净化，去除分离淋巴细胞时输入的枸橼酸盐、进入体内的多余水分、以及干细胞培养液，提高了被免疫调控后的淋巴细胞回输至体内的安全性，减小了不良反应和顾虑，提高了安全性，有效推广了免疫细胞调控治疗。
一种淋巴细胞分离干细胞免疫调控净化系统

[发明专利]一种活性化T淋巴细胞培养液及其活性化T淋巴细胞的制备方法-CN201910504262.4有效
发明人：杨罕闻 -专利权人：蓝莲（杭州）生物科技有限公司
申请日： 2019-06-12 - 公布日： 2021-04-06 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：一种活性化T淋巴细胞培养液及其活性化T淋巴细胞的制备方法，属于细胞培养技术领域。包括AT细胞的培养和AT细胞的收获两大步骤。上述一种活性化T淋巴细胞培养液及其活性化T淋巴细胞的制备方法，其通过使用Lymactin‑T抗CD3单克隆抗体配合IL‑2，IL‑6的方法，效率极高的激活T淋巴细胞并诱导期快速增殖；并使用PMA和离子霉素配合的方法激活T细胞；该方法具有效率高，纯度高等优点。
一种活性淋巴细胞培养液及其制备方法

[发明专利]一种淋巴细胞培养基及其使用方法-CN201110298152.0无效
发明人：张赞;苏国新 -专利权人：上海柯莱逊生物技术有限公司
申请日： 2011-09-28 - 公布日： 2012-02-15 - 主分类号： C12N5/0781 文献下载
摘要：本发明属于体外细胞培养技术领域，涉及一种淋巴细胞培养基，该淋巴细胞培养基包括基础培养基以及血清替代物，所述血清替代物包括重组人血白蛋白、重组人转铁蛋白以及重组人胰岛素，用以解决现有淋巴细胞培养基大多采用动物或人的血清及其组分作为添加物
一种淋巴细胞培养基及其使用方法

[发明专利]肿瘤浸润淋巴细胞的种子细胞培养基及其应用-CN202180038540.7在审
发明人：金华君;何周;马星明;李甜甜;黄晨 -专利权人：上海君赛生物科技有限公司
申请日： 2021-05-28 - 公布日： 2023-02-03 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本申请涉及一种肿瘤浸润淋巴细胞的种子细胞培养基及其应用，所述培养基包括以下的组分：细胞培养成分、细胞因子和免疫检查点抗体或其抗原结合片段，其中所述细胞因子包括IL‑2，所述免疫检查点包括：PD‑1、LAG‑3、TIGIT和/或CTLA‑4，所述细胞培养成分为血清培养基或无血清培养基。本申请所述的种子细胞培养基可以加快培养肿瘤浸润淋巴细胞的种子细胞，和/或缩短肿瘤浸润淋巴细胞所需的扩增时间。
肿瘤浸润淋巴细胞种子细胞培养基及其应用

[发明专利]人体外周血淋巴细胞培养基及其应用-CN200910050790.3有效
发明人：崔贻芬 -专利权人：上海尧浩生物技术有限公司
申请日： 2009-05-07 - 公布日： 2009-10-07 - 主分类号： C12N5/08 文献下载
摘要：本发明涉及一种人体外周血淋巴细胞培养基及其应用，本发明的人体外周血淋巴细胞培养基，包括：RPMI1640液体培养基77-81.9％、牛血清10-14.9％、PHA 4-6％、非硫酸化糖胺聚糖2-5％、CPPs本发明提供的细胞培养基淋巴细胞转换率与淋巴细胞分裂指数高，试剂稳定性好，得到的人体染色体图形可为染色体核型分析临床诊断提供强有力的依据。
人体外周血淋巴细胞培养基及其应用

[实用新型]淋巴细胞培养采血管-CN202220115400.7有效
发明人：张鹏 -专利权人：广西壮族自治区人民医院
申请日： 2022-01-17 - 公布日： 2022-06-03 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型公开一种淋巴细胞培养采血管，该淋巴细胞培养采血管通过采用采血管的管体连接于弹性挤压管，分隔膜设于管体和弹性挤压管之间，分隔膜和管体围合形成一端开口的培养腔，分隔膜和弹性挤压管围合形成密封腔，管帽可拆卸地盖合于培养腔的开口端，并开设有采血口和连通培养腔的透气孔，密封垫可拆卸地盖合于透气孔，凸刺设于密封腔内，并与弹性挤压管相连接。本实用新型的淋巴细胞培养采血管具有采血和培养的一体化功能，同时能在较大程度简化淋巴细胞培养操作的同时，避免细菌进入采血腔内，较大程度的提高了淋巴细胞的培养效果。
淋巴细胞培养血管

[发明专利]体外快速扩增肾癌的肿瘤浸润淋巴细胞的方法-CN201910068302.5有效
发明人：董晨;倪凌;洪善娟 -专利权人：清华大学
申请日： 2019-01-24 - 公布日： 2023-02-03 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明提出了一种体外快速扩增肾癌的肿瘤浸润淋巴细胞的方法。该方法包括：(1)将肾癌组织接种于第一细胞培养器皿中，使肿瘤浸润淋巴细胞在第一培养条件下从所述肾癌组织中释放；(2)将释放的肿瘤浸润淋巴细胞在第二培养条件下进行缓慢扩增培养；(3)将缓慢扩增培养后的肿瘤浸润淋巴细胞接种于第二细胞培养器皿中，并在第三培养条件下进行快速扩增培养，以便获得临床用肾癌的肿瘤浸润淋巴细胞，其中，在步骤(3)中，所述缓慢扩增培养后的肿瘤浸润淋巴细胞的个数相对于第二培养器皿底面积的接种密度为1.5～3*10淋巴细胞的快速释放和扩增，能够在短时间内获得足够数量的、可供临床应用的、具有显著肾癌肿瘤细胞杀伤力的肿瘤浸润淋巴细胞。
体外快速扩增肾癌肿瘤浸润淋巴细胞方法

[发明专利]免疫细胞培养基体系-CN201611233172.9有效
发明人：习佳飞;姚海雷;裴雪涛;岳文;陈琳;南雪;张亚 -专利权人：华南生物医药研究院
申请日： 2016-12-28 - 公布日： 2020-10-16 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明公开了免疫细胞培养基体系及其应用。其中，免疫细胞培养基体系包括：免疫细胞激活培养基，所述免疫细胞激活培养基为添加了血浆、白介素‑2和沙培林的无血清淋巴细胞培养基；免疫细胞扩增培养基，所述免疫细胞扩增培养基为添加了白介素‑2和沙培林的无血清淋巴细胞培养基；以及免疫细胞规模化扩增培养基，所述免疫细胞规模化扩增培养基为添加了白介素‑2的无血清淋巴细胞培养基。利用该免疫细胞培养基体系对单个核细胞进行诱导扩增培养，具有诱导效率高、扩增速度快、安全性高、成本低、来源广和无需饲养层细胞等优点，从而满足临床治疗大量自然杀伤细胞的需要。
免疫细胞培养基体系

[实用新型]一种用于淋巴细胞的培养装置-CN201721338926.7有效
发明人：淦志兵 -专利权人：上海柏根生物科技有限公司
申请日： 2017-10-18 - 公布日： 2018-05-15 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种用于淋巴细胞的培养装置，包括细胞培养舱、密封舱门、培养架和细胞培养皿,细胞培养舱上设置有通风口,密封舱门上设置有透视窗,透视窗下方设置有灯光调节开关,灯光调节开关一侧设置有温度控制开关,细胞培养舱内部安装有高低温晶圆夹管,高低温晶圆夹管两侧安装有LED紫外线灯,LED紫外线灯一侧设置有培养架,细胞培养舱内部设置有细胞培养皿,细胞培养皿一侧设置有下基面,下基面上端设置有复合柔性膜,复合柔性膜上端设置有上基面,细胞培养皿内部设置有细胞培养孔,细胞培养孔一侧设置有细胞养分送入口。本实用新型通过设置有细胞培养舱,可以保障淋巴细胞培养环境的稳定，设置有多层培养架,增加淋巴细胞数量。
一种用于淋巴细胞培养装置

[发明专利]一种用于淋巴细胞培养的培养基及应用-CN201310349694.5有效
发明人：惠长野;李智民;张文;高朝贤;陈郁筠;黄先青;陈钰婷;张健杰 -专利权人：深圳市职业病防治院
申请日： 2013-08-12 - 公布日： 2013-11-27 - 主分类号： C12N5/0781 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于淋巴细胞培养的培养基及应用。本发明提供的用于淋巴细胞培养的培养基，包括基础培养基、混合脱氧单核苷酸和人血浆。所述混合脱氧单核苷酸中的每种核苷酸在所述培养基中的浓度为5-50mmol/L，优选为5-20mmol/L。所述人血浆在所述培养基中的体积百分含量可为5-30%，优选为10-20%或20-30%。所述培养基中还可包括抗凝剂、有丝分裂原和抗生素。本发明提供的培养基最大限度地模拟了人体内环境，无异源物质干扰，保证了细胞培养效果；额外添加的外源核苷酸满足淋巴细胞快速生长、DNA复制的需求。应用本发明提供的培养基培养淋巴细胞，可满足细胞遗传学培养淋巴细胞的需求。
一种用于淋巴细胞培养培养基应用

[发明专利]一种体外活化小鼠T淋巴细胞的方法-CN201810631726.3在审
发明人：杨加彩;刘美希;王旭;李传贵;宋亚军 -专利权人：中国人民解放军陆军军医大学第二附属医院
申请日： 2018-06-19 - 公布日： 2018-11-20 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种体外活化小鼠T淋巴细胞的方法，具体包括如下步骤：A.获取小鼠脾脏、外周淋巴结、粘膜上皮或外周血的淋巴细胞；B.筛选出CD3ε+淋巴细胞，并检测其纯度；C.用具有生物活性的抗小鼠CD3ε和CD28两种抗体包被48孔细胞培养板；D.将步骤C所得的细胞培养板中加入活化T淋巴细胞的培养基重悬细胞；E.将步骤D所得细胞板在CO₂培养箱培养8～12小时。该方法可以在短时间内使T淋巴细胞的活化率达到90％以上，对于后续T淋巴细胞在多种生物学功能方面的研究具有重要的意义。
淋巴细胞活化小鼠小鼠种体活化T淋巴细胞生物技术领域生物学功能细胞培养板淋巴结抗体包被生物活性粘膜上皮培养基活化率外周血细胞板脾脏外周重悬筛选细胞检测研究

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